产品货号：
KFS316
中文名称：
细胞增殖与毒性检测试剂盒(MTT)
英文名称：
MTT cell proliferation and Cytotoxicity Detection Kit
产品规格：
500T|1000T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒以代谢还原噻唑蓝(MTT)为基础。活细胞的线粒体中存在与NADP相关的脱氢酶，可将黄色的MTT还原为不溶性的蓝紫色的甲臜(Formazan)，死细胞此酶消失，MTT不被还原。用DMSO溶解Formazan后可用酶标仪在490nm波长处检测光密度。
| 组分 | 500T | 1000T | 保存条件 |
| 5×MTT | 5mL | 10mL | -20℃，避光 |
| Dilution Buffer | 25mL | 50mL | 2～8℃ |
保存：-20℃，避光，避免反复冻融，有效期1年。
低速离心机、平板摇床、酶标仪(490nm波长)、微量移液器、96孔板、1.5mL Microtube、DMSO。
- 悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。
- Formazan的生成不仅与活细胞数成比例，也受作用时间的影响，因此当样品较多时测定的OD值可能随时间而变。
- 用不同试剂溶解Formazan时，测定的OD值不用：DMSO溶解时，建议在490nm波长下检测；若用含SDS的相关溶剂溶解，建议在570nm下检测。
- 在96孔板加入细胞100μL/孔(约1×104)，置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时。
- 加入适当浓度的受试化合物。
- 将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
- 将5×MTT用Dilution Buffer稀释成1×MTT。
- 每孔加50μL 1×MTT，在37℃孵育4小时，使MTT还原为甲臜。
- 吸出上清液，每孔加150μL DMSO使甲月赞溶解，用平板摇床摇匀。
- 酶标仪在490nm波长处检测每孔的光密度。
- 结果分析
- 细胞的存活率：将各测试孔的OD值减去本底OD值(完全培养基加MTT，无细胞)或空白药物孔OD值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞)，各重复孔的OD值取均数±SD。
细胞的存活率以T/C%表示，T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。
细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 - 求出T/C = 50%时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
- 细胞的存活率：将各测试孔的OD值减去本底OD值(完全培养基加MTT，无细胞)或空白药物孔OD值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞)，各重复孔的OD值取均数±SD。
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